物质的提纯—柱层析法

物质的提纯—柱层析法

——许昌学院化工与材料学院“探实验之美，品合成之魅”研究实践队

在化学实验的物质的分离提纯步骤上有很多的方法，其中很重要的一种，也是用处非常长广泛的一种方法就是柱层析法。

所谓柱层析法，又称为柱色谱技术，主要原理是根据样品混合物中各组分在固定相和流动相中分配系数不同，经多次反复分配将组分分离开来，达到分离提纯的目的。在我们的实践过程中，这种方法也是被广泛的使用。进行柱层析分离的步骤一般分为这几步：选择合适的规格玻璃柱—填充固定相（硅胶）—上样—用洗脱剂进行洗脱。

首先，选择好合适规格的玻璃柱后，把柱层析硅胶用适当的溶剂搅拌均匀，在填入柱子中，随后用溶剂加压淋洗，俗称“压柱子”，这种方法被称为湿法装柱。这种方法与用直接用干硅胶装柱的方法相比，最大的好处就是所装的柱子比较结实，不容易产生气泡，使样品分离效果更好。

同样，上样这一步骤也有干法和湿法之分。干法就是把待分离的样品用少量溶剂溶解后，在加入少量硅胶，拌匀后再旋去溶剂。如此得到的粉末再小心加到柱子的顶层。湿法上样就是用少量溶剂将样品溶解后，再用胶头滴管转移得到的溶液，沿着层析柱内壁均匀加入，然后用少量溶剂洗涤后，再加入。上样完毕后，接着即用淋洗剂淋洗。淋洗剂一般采用TLC分析得到的展开剂的比例再稀释一倍后的溶剂。之后缓慢洗脱，就可以将样品分离纯化出来。

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