华北水利水电大学水之源社会实践队——水源总大肠杆菌群的检验一

2019年8月27日，华北水利水电大学水之源社会实践队进行了水中大肠杆菌含量的第一段测定实验。由六名实验队员共同参与完成，包括实验前的配置培养基 、水样的采集和保藏以及初发酵实验。

总大肠杆菌群是一群在37℃培养24h能发酵乳糖、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌。通常可根据水中总大肠杆菌群的数量来判断水源是否被分辨所污染，并间接推测水源受肠道病原菌感染的可能性。该测定实验结合给水净化工程中的细菌学检验，通过配置培养基、水样的采集和保藏、接种大肠杆菌、染色观察、接种培育、选择计数得到自来水和地表水中的大肠杆菌群含量。

首先，进行的是培养基的配置工作，有乳糖蛋白胨培养基（共多管发酵法的初发酵、复发酵用）；3倍浓缩乳糖蛋白胨培养液（供多管法的初发酵用）；伊红美蓝培养基（供多管发酵的平板划线用）。制备培养基需要掌握电子天平使用的方法、溶液配置的方法、培养基的加热方法、高温灭菌仪器的使用方法。配置培养基要求实验队员有较强的动手能力，掌握基本原理的同时对实验仪器有充分的认识。作为实验前的准备工作，决定了后续实验的精确程度，实验队员高度重视，谨慎认真。

然后，对事前灭菌的水样采集保藏。水样共有13组，来自河南各个地区地表水和自来水。水样采取后，放在4℃冰箱内保存，若缺乏低温保存条件，应在报告中注明水样采集与检验间隔的时间，较清洁的水可在12h以内检验，污水要在6h内结束检验。

本实验的核心步骤是多管发酵法（MPN法），适用于饮用水、水源水，特别是浑浊度高的水中总大肠杆菌的测定。测定步骤分为稀释水样和初发酵试验。水样稀释过程要在无菌条件下进行，采用10倍稀释法；初发酵试验也需要无菌操作，置于37度恒温箱中保存24h后观察结果。水源的测定包括初发酵试验、确定性实验、复发酵实验等，需要花费一定的时间培养。

经过一天的努力，大肠杆菌群数的测定实验的第一阶段完成，经过24小时地培养之后才能进行第二阶段试验，实验过程中队员之间配合使得试验效率更高，对时间的安排更加合理，强化了协作共助能力。

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